Samuel dos Santos nasceu em Salvador, na Bahia, em 11 de outubro de 1922.
Começou sua carreira no início da década de 1950, quando estreou no cinema, fazendo o filme “Sinhá Moça“, em 1953, uma produção da Companhia Vera Cruz.
Em seguida, Samuel começou a participar das grandes produções da TV Tupi, a pioneira. Fez várias vezes o programa que ia ao ar a cada quinze dias, no domingo, e que ficou no ar por 16 anos, que foi o “TV de Vanguarda”. Não se contentando em ser apenas ator, Samuel dos Santos também trabalhava como assistente de produção e de direção.
Em Cinema, o ator teve bastante espaço e atuou ainda em “O Sobrado”, em 1956; “Osso, Amor e Papagaio” e “O Grande Momento”.
Na Televisão ele estreou em 1954, no “Teatro Experimental do Negro” na TV Tupi. Foi para o Rio de Janeiro e fez teleteatros na TV Continental, e foi em 1977 que ele chegou a TV Globo no “Sítio do Picapau Amarelo”, fazendo o personagem Tio Barnabé. Fez também alguns episódios do “Caso Verdade” em 1982 e 1983.
Samuel dos Santos faleceu, após uma cirurgia de pâncreas, em 24 de fevereiro de 1993, na capital paulista, aos 70 anos de idade.